Ekspresija vimentina pri epitelno-mezenhimalnoj pretvorbi u nefrotoksičnosti izazvanoj cisplatinom u štakora soja Wistar

diplomski rad

• Naslov (engleski): Vimentin expression in nefrotoxic epithelial-mesenchymal transition caused by cysplatine in Wistar rat
• Autor: Zorica Barth
• Mentor: Marija Ljubojević (mentor)
• Mentor: Domagoj Đikić (komentor)
• Član povjerenstva: Domagoj Đikić (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Nada Oršolić (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Ivana Šola (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Dubravka Hranilović (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Prirodoslovno-matematički fakultet; (Biološki odsjek); Zagreb
• Datum i država obrane: 2024-02-27, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: PRIRODNE ZNANOSTI; Biologija

Sažetak

Cisplatina je jedan od najčešćih kemoterapeutika u liječenju solidnih tumora.Vezanje cisplatine za DNA uzrokuje smrt neoplazmi, dok je nefrotoksičnost glavna negativna strana terapije. U štakorskom modelu nefrotoksičnosti cisplatine dolazi do oštećenja ravnog dijela proksimalnog kanalića (PK). Epitelno-mezenhimalna tranzicija (EMT) se očituje jedinstvenim molekulskim i morfološkim promjenama, pri čemu stanice mijenjaju ekspresiju proteina, gube polarnost, diferenciranost i funkciju epitelne barijere. Prethodno uočene promjene citoskeleta aktina i tubulina u epitelnim stanicama PK uz promjenu ekspresije intermedijarnog proteina vimentina ukazale bi da li se u nefrotoksičnosti cisplatine zbiva EMT. Korišteni su arhivski uzorci modela nefrotoksičnosti nakon jednokratne obrade cisplatinom (i.p. u dozi 5 mg/kg) mužjaka štakora soja Wistar. Najizraženiji učinak toksičnosti javlja se 5. dan nakon tretmana, a pratio se i vremenski tijek u kojem EMT nastaje. Praćenje raspodjele vimentina rađeno je imunofluorescencijski na tkivnim rezovima. Prisutnosti vimentina praćena je u homogenatima tkiva bubrega analizom western blot, dok se promjena u ekspresiji glasničke RNA pratila end- point RT-PCR tehnikom. Pojava ekspresije vimentina uočena je kroz vremenski tijek (3. dan) u tkivnim rezovima te je nađena promjena u prisutnosti proteina u homogenatima tkiva 5. dan. Nefrotoksičnost cisplatine još nije u potpunosti razjašnjena, a naši rezultati pokazuju uključenost EMT koja može objasniti gubitak funkcije bubrega i uputiti na mehanizme obrane od sekundarnih tumora i nefrotoksičnosti kod pacijenata tretiranih cisplatinom.

Sažetak (engleski)

In the treatment of solid tumors, one of the most common chemotherapeutic agents is cisplatin. The binding of cisplatin to DNA causes the death of neoplasms, while nephrotoxicity is the main downside of this therapy. In a rat model of cisplatin nephrotoxicity, damage even part of the proximal tubule (PK) occurs. Epithelial-mesenchymal transition (EMT) manifests itself through unique molecular and morphological changes, wherein cells undergo alterations in protein expression, lose polarity, differentiation, and epithelial barrier function. Previously observed cytoskeletal changes in actin and tubulin in PK epithelial cells, along with a change in the expression of intermediate protein vimentin, would indicate whether EMT occurs in cisplatin nephrotoxicity. Archival nephrotoxicity model samples were used after a single treatment with cisplatin (i.p. at a dose of 5 mg/kg) in male Wistar rats. The most pronounced toxicity effect occurs on the 5th day after treatment, during which the time course of EMT was also monitored. Vimentin distribution was observed through immunofluorescence on tissue sections. The presence of vimentin was monitored in the homogenates of kidney tissue by western blot analysis, while changes in the expression of messenger RNA were monitored using endpoint RT-PCR technique. The appearance of vimentin expression was observed over time (day 3) in tissue sections, and a change in the presence of proteins in tissue homogenates was found on day 5. The nephrotoxicity of cisplatin has not yet been fully elucidated, and our results indicate an involvement of EMT that can explain the loss of kidney function, pointing to defense mechanisms against secondary tumors and nephrotoxicity in patients treated with cisplatin.

• Ključne riječi: Oštećenje DNA; S3 odsječak proksimalnih kanalića nefrona bubrega; mezangijske stanice
• Ključne riječi (engleski): DNA damage; S3 segment of the proximal tubule of the nefron in the kidney; mesangial cells
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:217:129236
• Projekt: Šifra: 533-03-23-0006; Naziv: Procjena učinkovitosti i toksičnosti biološki aktivnih tvari; Kratica: BioMolTox; Voditelj: Nikolina Maček Hrvat; Pravna nadležnost: Hrvatska; Financijer: European Union; Linija financiranja: Next Generation EU
• Studijski program: Naziv: Eksperimentalna biologija; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: diplomski; Akademski / stručni naziv: sveučilišni/a magistar/magistra eksperimentalne biologije (univ. mag. biol. exp.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Rad dostupan nakon; Datum isteka embarga: 2026-03-01
• Datum i vrijeme pohrane: 2024-03-21 11:36:44