Razvoj metode uzastopne analize N-glikoma imunoglobulina A i G iz istog početnog uzorka humane krvne plazme

diplomski rad

• Naslov (engleski): Method development for consecutive analysis of N-glycomes of immunoglobulins A and G from the same initial sample of human blood plasma
• Autor: Cristina Maligec
• Mentor: Gordan Lauc (mentor)
• Član povjerenstva: Aleksandra Maršavelski (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Ivica Đilović (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Ivan Nemet (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Iva Juranović Cindrić (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Prirodoslovno-matematički fakultet; (Kemijski odsjek); Zagreb
• Datum i država obrane: 2024-09-24, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: PRIRODNE ZNANOSTI; Kemija

Sažetak

Razvijena je metoda za analizu N-glikana imunoglobulina A (IgA) i G (IgG) iz istog uzoraka humane krvne plazme. Cilj istraživanja bio je optimizirati izolaciju oba imunoglobulina korištenjem afinitetne kromatografije i ispitati njihove glikozilacijske profile. IgA i IgG izolirani su primjenom protein G pločice za IgG i CaptureSelectTM IgA afinitetnih zrnaca za IgA. Nakon izolacije, N-glikani su obilježeni fluorescentnom oznakom prokainamida i analizirani pomoću tekućinske kromatografije ultra visoke djelotvornosti s fluorescencijskom detekcijom (HILIC-UHPLC-FLR), što je omogućilo visoko osjetljivo praćenje glikozilacijskih obrazaca. Rezultati su pokazali različite obrasce glikozilacije između IgA i IgG, pri čemu IgA ima složenije i raznovrsnije glikanske strukture. Razvijena metoda omogućuje istovremenu analizu oba imunoglobulina iz istog uzorka plazme, smanjujući potrebu za većim količinama biološkog materijala i povećavajući preciznost analize.

Sažetak (engleski)

A method was developed for the analysis of N-glycans from immunoglobulin A (IgA) and G (IgG) from the same human plasma sample. The aim of the study was to optimize the isolation of both immunoglobulins using affinity chromatography and to examine their glycosylation profiles. IgA and IgG were isolated using protein G plate for IgG and CaptureSelectTM IgA affinity beads for IgA. After isolation, the N-glycans were labeled with a fluorescent tag (procainamide) and analyzed by hydrophilic interaction liquid chromatography coupled with ultra-high-performance liquid chromatography and fluorescence detection (HILIC-UHPLC-FLR), which enabled highly sensitive tracking of glycosylation patterns. The results showed distinct glycosylation patterns between IgA and IgG, with IgA exhibiting more complex and diverse glycan structures. This method allows for the simultaneous analysis of both immunoglobulins from the same sample, reducing the need for larger quantities of biological material and increasing the precision of the analysis.

• Ključne riječi: afinitetna kromatografija; HILIC-UHPLC-FLR; imunoglobulin A; imunoglobulin G; N-glikani; N-glikozilacija; plazma
• Ključne riječi (engleski): ffinity chromatography; HILIC-UHPLC-FLR; immunoglobulin A; immunoglobulin G; N-glycans; N-glycosylation; plasma
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:217:904169
• Studijski program: Naziv: Kemija; smjerovi: Istraživački; Smjer: Istraživački; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: diplomski; Akademski / stručni naziv: sveučilišni/a magistar/magistra kemije (univ. mag. chem.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup
• Datum i vrijeme pohrane: 2024-10-22 13:27:09