Razvoj metode HPLC za određivanje serotonina, dopamina i noradrenalina u tkivu mozga štakora

diplomski rad

• Naslov (engleski): Development of a HPLC method for serotonin, dopamine and noradrenaline determination in rat brain tissue
• Autor: Dora Peršić
• Mentor: Sofia Ana Blažević (mentor)
• Član povjerenstva: Sofia Ana Blažević (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Mirta Tkalec (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Biljana Balen (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Ivana Šola (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Prirodoslovno-matematički fakultet; (Biološki odsjek); Zagreb
• Datum i država obrane: 2017-05-31, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: PRIRODNE ZNANOSTI; Biologija

Sažetak

Serotonin, dopamin i noradrenalin neurotransmiteri su s mnogim funkcijama u mozgu. Promjene u njihovom metabolizmu povezane su s neurorazvojnim poremećajima, što određivanje njihovih razina čini ključnim za razumijevanje tih poremećaja. Analitička metoda koja se često koristi u tu svrhu je tekućinska kromatografija visoke djelotvornosti (engl. high-performance liquid chromatography, HPLC). Za analizu traženih spojeva potrebno je razviti metodu, a razvijenu metodu zatim treba validirati. U ovom diplomskom radu, razvila sam brzu metodu HPLC s UV detekcijom za određivanje koncentracija serotonina, dopamina i noradrenalina u tkivu mozga štakora. Razvijenu metodu validirala sam odredivši njenu selektivnost, linearnost i ponovljivost za svaki analit. Rezultati validacije pokazali su dobru selektivnost za sve analite. Linearnost i ponovljivost bile su dobre za serotonin, dok za dopamin i noradrenalin nisu bile u potpunosti zadovoljavajuće, vjerojatno uslijed njihove oksidativne degradacije. U usporedbi koncentracija određenih razvijenom metodom s onima dobivenim komercijalnom metodom ELISA nisam ustanovila korelaciju, stoga rezultati upućuju na potrebu za pronalaskom boljeg načina pripreme i pohrane uzoraka.

Sažetak (engleski)

Serotonin, dopamine and noradrenaline are neurotransmitters with many functions in the brain. Changes in their metabolism have been implicated in various neurodevelopmental disorders, making determination of their levels necessary for a better understanding of those disorders. An analytical method often used for this purpose is high-performance liquid chromatography (HPLC). In this study, I have developed a rapid HPLC method with UV detection for serotonin, dopamine and noradrenaline determination in rat brain tissue. I have validated the developed method by analyzing its selectivity, linearity and repeatability. The method showed good selectivity for all three neurotransmitters. Linearity and repeatability were good for serotonin, while they were not completely satisfactory for dopamine and noradrenaline, pressumably due to their oxidative degradation. Comparison of serotonin, dopamine and noradrenaline levels determined by the developed method with those obtained by a commercially available ELISA method did not show any correlation, indicating a need for further improvement of sample preparation and storage.

• Ključne riječi: HPLC-UV; serotonin; dopamin; noradrenalin; ELISA; mozak
• Ključne riječi (engleski): HPLC-UV; serotonin; dopamine; noradrenaline; ELISA; brain
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:217:628443
• Studijski program: Naziv: Molekularna biologija; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: diplomski; Akademski / stručni naziv: magistar/magistra molekularne biologije (mag. biol. mol.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup; Datum isteka embarga: 2019-05-31
• Datum i vrijeme pohrane: 2017-07-14 09:21:17