Utjecaj nanočestica željezovih oksida obloženih PEG-om i D-manozom na vijabilnost i diferencijaciju hondrocita

diplomski rad

• Naslov (engleski): Effects of PEG and D-mannose coated iron oxide nanoparticles on chondrocyte viability and differentiation
• Autor: Tihana Marić
• Mentor: Inga Marijanović (mentor)
• Član povjerenstva: Inga Marijanović (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Vesna Benković (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Damjan Franjević (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Maja Matulić (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Prirodoslovno-matematički fakultet; (Biološki odsjek); Zagreb
• Datum i država obrane: 2017-12-14, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: PRIRODNE ZNANOSTI; Biologija

Sažetak

Cilj ovog rada je ispitati utjecaj nanočestica željezovih oksida obloženih PEG-om i D-manozom na adherentnu i diferencijacijsku kulturu hondrocita. Nanočestice su nanometarske strukture koje imaju potencijalnu primijenu u praćenju i vizualizaciji stanica i tkiva magnetskom rezonancom. Pomoću bojenja kristal-violetom i testa isključenja tripanskog modrila praćeno je preživljenje i proliferacija hondrocita tretiranih nanočesticama što je vizualno potvrđeno testom Live/Dead. Preživljenja su bila visoka za obje vrste nanočestica, a najviše su proliferirali uzorci tretirani nanočesticama manoze. Bojanjem berlinskim modrilom provjerena je uspješnost obilježavanja hondrocita te je utvrđeno kako samo nanočestice manoze obilježavaju stanice. Rediferencijacijski potencijal hondrocita, provjeren u uvjetima koji potiču njihovu diferencijaciju, nije bio narušen nakon tretmana nanočesticama što se pratilo pomoću histoloških bojanja hemalaun-eozinom i safraninom O. Budući da su samo nanočestice manoze detektirane nakon 14 dana hondrogene kulture hondrocita, ekspresija hondrogenih markera se provjerila metodom qPCR u stvarnom vremenu. Hondrociti u diferencijacijskoj kulturi su eksprimirali hondrogene markere te je histološka provjera tkiva kvantitativno potvrđena. Nanočestice manoze bi mogle obilježavati hondrocite u adherentnoj kulturi, dok se nanočestice PEG-a ispiru te bi bilo dobro ispitati mogućnost drugačijeg načina njihovog obilježavanja.

Sažetak (engleski)

The aim of this study was to investigate the nanoparticle effect on the nasal chondrocytes in 2D and 3D culture. Viability assays showed no significant reduction in chondrocyte survival after treatment with PEG coated and D-mannose coated nanoparticles. Even treatment with the highest concentration of nanoparticles did not affect chondrocyte survival. Proliferation rate was also determined and showed a positive proliferation trend for treated and control cells. Interestingly, cells treated with D-mannose nanoparticles had higher proliferation rate than control cells or cells treated with PEG-coated nanoparticles. Next, chondrocytes were pretreated with both types of nanoparticles and cultivated in chondrogenic medium for 14 days. Histological staining and qPCR for chondrogenic markers showed that differentiation potential of treated chondrocytes was similar as in control cells. Lastly, the labeling efficiency assay showed that only D-mannose nanoparticles labeled chondrocytes in 2D and 3D culture were internalized. PEG coated nanoparticles were washed away.

• Ključne riječi: PEG; manoza; nanočestice; hondrociti; preživljenje; diferencijacija
• Ključne riječi (engleski): PEG; mannose; nanopraticles; chondrocytes; viability; differentiation
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:217:491388
• Studijski program: Naziv: Molekularna biologija; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: diplomski; Akademski / stručni naziv: magistar/magistra molekularne biologije (mag. biol. mol.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup; Datum isteka embarga: 2019-12-14
• Datum i vrijeme pohrane: 2018-01-31 09:58:52