Utjecaj ljudskih proteina alfa-enolaze i MBP-1 na stabilizaciju telomera u mišjim fibroblastima A9

diplomski rad

• Naslov (engleski): Influence of human proteins alfa-enolase and MBP-1 on telomere stabilization in mice fibroblasts A9
• Autor: Tanja Božić
• Mentor: Ivica Rubelj (mentor)
• Mentor: Maja Matulić (mentor)
• Član povjerenstva: Maja Matulić (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Ivica Rubelj (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Mirjana Kalafatić (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Nataša Bauer (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Prirodoslovno-matematički fakultet; (Biološki odsjek); Zagreb
• Datum i država obrane: 2014-02-17, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: PRIRODNE ZNANOSTI; Biologija

Sažetak

Mišji fibroblasti A9 imaju telomere duljine ~9 kb. Kada se u stanice A9 unese ljudski kromosom 1, ili ljudski proteini kodirani s tog kromosoma, α-enolaza ili MBP-1, duljina telomera se skrati na ~4 kb. Promjena ravnotežne točke na kraće duljine može upućivati na promjenu telomerne konformacije te veću stabilnost njihove strukture. Zato sam provjerila duljine telomera u normalnim i hibridnim fibroblastima A9, te utvrdila nastaju li u tim stanicama t-krugovi koji su inače indikator nestabilnosti telomera. Duljine telomera sam provjerila analizom po Southernu, a t-krugove sam istražila 2D gel elektroforezom DNA i tehnikom umnažanja signala t-krugova kotrljajućom sintezom. Rezultati su pokazali da su telomere u hibridnim stanicama A9 skraćene te da u njima dolazi do značajnog smanjenja nastanka t-krugova. Činjenica da unošenje ljudskog kromosoma 1 te ljudskih proteina α-enolaze i MBP-1 u stanice A9 uzrokuje skraćenje telomera, znači da su telomere u ovim stanicama i stabilnije, zbog čega po svojoj dinamici nalikuju na ljudske telomere.

Sažetak (engleski)

Mice fibroblasts A9 have telomeres ~9 kb in length. Introducing the human chromosome 1 or human proteins coded from the same chromosome, α-enolase or MBP-1 into A9 cells, causes telomere lenght reduction to ~4 kb. Change in the equilibrium point to shorter lengths could suggest a change in telomere conformation and their increased stability. For that reason I have verified the telomere length in normal and hybrid fibroblasts A9 and determined the occurrence of t-circles which indicate telomere instability. Telomere length was verified by Southern blot analysis, and t-circles were analysed by 2D gel electrophoresis and by t-circle amplification assay based on rolling circle amplification. Results demonstrate telomere shortening in hybrid A9 cells and significantly lower occurance of t-circles. Introduction of human chromosome 1 or human proteins α-enolase or MBP-1 into A9 cells causes telomere shortening and their stabilization and therefore their telomere dynamics resembles the human.

• Ključne riječi: A9 stanice; α-enolaza; MBP-1; telomere; t-krugovi
• Ključne riječi (engleski): A9 cells; α-enolase; MBP-1; telomeres; t-circles
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:217:722408
• Studijski program: Naziv: Molekularna biologija; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: diplomski; Akademski / stručni naziv: magistar/magistra molekularne biologije (mag. biol. mol.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Pristup korisnicima matične ustanove
• Datum i vrijeme pohrane: 2017-04-26 08:42:22