Optimizacija uvjeta za trodimenzionalni rast hrskavice in vitro

diplomski rad

• Naslov (engleski): Optimization of conditions for in vitro three-dimensional cartilage growth
• Autor: Mihaela Jagrić
• Mentor: Inga Marijanović (mentor)
• Član povjerenstva: Inga Marijanović (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Jasna Hrenović (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Duje Lisičić (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Maja Matulić (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Prirodoslovno-matematički fakultet; (Biološki odsjek); Zagreb
• Datum i država obrane: 2016-02-29, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: PRIRODNE ZNANOSTI; Biologija

Sažetak

Artikularna hrskavica je tkivo koje nema sposobnost spontane regeneracije. Tkivno inženjerstvo, kao novo područje regenerativne medicine, nudi potencijalna učinkovita rješenja u liječenju ozljeda i oštećenja artikularne hrskavice. Cilj ovoga istraživanja bio je optimizirati uvjete za trodimenzionalni uzgoj hrskavice in vitro. U istraživanju su korištena tri različita tipa staničnih kultura: hondrociti, mezenhimske matične stanice iz koštane srži (hBMSCs) te kombinacija hondrocita i hBMSCs u omjeru 2:1. Stanice su uzgajane u diferencijacijskom mediju, inkorporirane u RADA peptidni hidrogel, u normoksičnim (20% O2) ili hipoksičnim (5% O2) uvjetima. Dexametazon, jedna od komponenti diferencijacijskoga medija, bila je dodana u medij ili inkorporirana sa stanicama u peptidnom hidrogelu. Nakon 19 dana metodom kvantitativnog PCR-a ispitana je razina ekspresije gena SOX9 i ACAN, karakterističnih za hrskavicu. Među korištenim tipovima stanica hondrociti su pokazali najviši, a hBMSCs najniži hondrogeni potencijal. Hipoksija je značajno poboljšala hondrogenezu jedino u slučaju hondrocita, dok izvor dexametazona nije bitno utjecao na razinu ekspresije gena SOX9 i ACAN.

Sažetak (engleski)

Articular cartilage is a tissue that shows no capacity for effective spontaneous regeneration. Tissue engineering, as a new important field of regenerative medicine, emerges as potential effective solution for treatment of articular cartilage injuries and defects. The aim of this study was to optimize conditions for 3D in vitro chondrogenesis. In the experiment, three different cell culture types were used: chondrocytes, human bone marrow mesenchymal stem cells (hBMSCs) and combination of chondrocytes and hBMSCs in 2:1 ratio. Cells were grown in a chondrogenic medium, incorporated in a peptide hydrogel RADA, in either normoxic (20% O2) or hypoxic (5% O2) conditions. Dexamethasone, one of the chondrogenic medium components, was added in a differentiation medium or it was incorporated with cells within a peptide hydrogel. After 19 days, expression levels of two cartilage marker genes, SOX9 and ACAN, were evaluated by quantitative PCR. Chondrocytes showed the highest and hBMSCs the lowest chondrogenic potential among used cell types. Hypoxia enhanced chondrogenesis significantly only in the case of chondrocytes, while dexamethasone source did not considerably influence on expression levels of SOX and ACAN genes.

• Ključne riječi: tkivno inženjerstvo; peptidni hidrogel; hondrogeneza; hondrociti; mezenhimske matične stanice; hipoksija
• Ključne riječi (engleski): tissue engineering; peptide hydrogel; chondrogenesis; chondrocytes; mesenchymal stem cells; hypoxia
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:217:793257
• Studijski program: Naziv: Molekularna biologija; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: diplomski; Akademski / stručni naziv: magistar/magistra molekularne biologije (mag. biol. mol.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup
• Datum i vrijeme pohrane: 2017-05-05 11:49:44